Steady-Glo ®荧光素酶检测试剂盒在Veritas微孔板发光检测仪上的应用

Steady-Glo ®荧光素酶检测试剂盒在Veritas微孔板发光检测仪上的应用
Turner BioSystems 公司的VeritasTM微孔板发光检测仪与Steady-Glo荧光素酶试剂盒联合使用提供了一种方便、快速且灵敏的定量基因表达的方法。转录调控和荧光素酶报告基因耦联表达，被用在研究培养细胞的生物学领域。荧光素酶是理想的报告基因，因为哺乳动物细胞中不含有内源性荧光素酶，转录完成立刻就生成功能性的荧光素酶。
Steady-Glo™荧光素酶检测系统的荧光素酶检测具有较高的灵敏度，Steady-Glo 试剂的发光半衰期大约为5 小时，光信号能在加入试剂后5min 到数小时之间都能检测到。同时Steady-Glo 试剂应该与哺乳动物细胞培养基（RPMI 1640, MEMa, DMEM and Ham's F12）相匹配，并且不会受到酚红和有机溶剂的影响。
VeritasTM微孔板发光检测仪与Steady-Glo™荧光素酶试剂盒联合使用时，有非常高的灵敏度，*低可以检测到1X10-18 mol 荧光素酶分子。荧光素酶的检测线性范围为1X10-18-1X10-11mol 或大于7个数量级（图 1）。实验由Steady-Glo 荧光素酶检测试剂盒（Promega 货号 # E2520）来完成，重组的萤火虫荧光素酶纯化，也用Promega 产品（Promega 货号 # E1701）。