Quant-iT™ RiboGreen® RNA定量检测试剂盒在TBS-380微型荧光计上的应用

Quant-iT™ RiboGreen® RNA定量检测试剂盒在TBS-380微型荧光计上的应用
Turner Biosystems的TBS-380 Mini-Fluorometer微型荧光计结合Molecular Probes的RiboGreen®试剂盒为RNA定量提供了超灵敏方法。在分子生物学实验中，小量RNA的检测和定量是非常重要的一步，其中包括体外转录RNA的产量检测、 Northern 印迹分析前RNA浓度测定、S1 核酸酶化验、核酶保护分析/ cDNA 文库构建、RT- PCR和差异显示PCR。
测量核酸浓度的常规方法是在260 nm (A260)波长下测量核酸溶液的吸光值。 这种方法的主要缺点是蛋白和游离核苷酸对光信号具有较大的干扰，无法区分DNA和RNA。 在核酸制备中经常发生的污染会引起这种干扰。一般来说，这种测量方法(浓度为4 µg/mLRNA中A260 ＝0.1) 不够灵敏。而应用荧光核酸染料能够避免很多由于核酸污染引起的问题。